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液相色譜柱如何進(jìn)行安裝和使用
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2016-11-17 11:16
概述
色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成，沒有色譜柱就不能進(jìn)行分離、定性與定量了，色譜柱是根據(jù)柱子里的填充物不同來區(qū)別的，填充物又是根據(jù)需要分離的物質(zhì)的極性來選擇的。
一、液相色譜柱的安裝
液相柱卡套柱的安裝（不加預(yù)柱）
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手
注意：
使用卡套柱時(shí)，兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時(shí)候都不能將卡套取下來，否則會(huì)造成填料的流失。
卡套柱的安裝（加預(yù)柱）：
1.將卡套架套入柱芯；
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯；
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片；
4.將“子彈頭”預(yù)柱放入卡套片內(nèi)；
5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊；
6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片（同時(shí)可以修補(bǔ)色譜柱）
注意：
在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前，應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補(bǔ)工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時(shí)帶出柱子內(nèi)的填料。
二、液相色譜柱的使用方法
1、色譜柱使用前注意事項(xiàng)
色譜柱的儲(chǔ)存液無特殊說明，均為評(píng)價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應(yīng)先用10％左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出，堵塞色譜柱。
2、流動(dòng)相
流動(dòng)相中所使用的各種有機(jī)溶劑要盡可能使用色譜純，配流動(dòng)相的水最好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍是2.0～8.0，BDSC18適合于堿性化合物，pH值適用范圍為2.0～10.0。當(dāng)必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí)，每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲(chǔ)存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗，并完全置換掉原來所使用的流動(dòng)相。
3、樣品
樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱（SPE）對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理；
若樣品不便處理，要使用保護(hù)柱，在用正相色譜法分析樣品時(shí)，所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴(yán)格脫水。
三、色譜柱的保存
1、反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng)
使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應(yīng)該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。
2、長期保存色譜柱
如色譜柱要長時(shí)間保存，必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲(chǔ)存于水（含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞）中，并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上，儲(chǔ)存的溫度最好是室溫。
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色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成，沒有色譜柱就不能進(jìn)行分離、定性與定量了，色譜柱是根據(jù)柱子里的填充物不同來區(qū)別的，填充物又是根據(jù)需要分離的物質(zhì)的極性來選擇的。
一、液相色譜柱的安裝
液相柱卡套柱的安裝（不加預(yù)柱）
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手
注意：
使用卡套柱時(shí)，兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時(shí)候都不能將卡套取下來，否則會(huì)造成填料的流失。
卡套柱的安裝（加預(yù)柱）：
1.將卡套架套入柱芯；
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯；
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片；
4.將“子彈頭”預(yù)柱放入卡套片內(nèi)；
5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊；
6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片（同時(shí)可以修補(bǔ)色譜柱）
注意：
在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前，應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補(bǔ)工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時(shí)帶出柱子內(nèi)的填料。
二、液相色譜柱的使用方法
1、色譜柱使用前注意事項(xiàng)
色譜柱的儲(chǔ)存液無特殊說明，均為評(píng)價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應(yīng)先用10％左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出，堵塞色譜柱。
2、流動(dòng)相
流動(dòng)相中所使用的各種有機(jī)溶劑要盡可能使用色譜純，配流動(dòng)相的水最好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍是2.0～8.0，BDSC18適合于堿性化合物，pH值適用范圍為2.0～10.0。當(dāng)必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí)，每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲(chǔ)存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗，并完全置換掉原來所使用的流動(dòng)相。
3、樣品
樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱（SPE）對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理；
若樣品不便處理，要使用保護(hù)柱，在用正相色譜法分析樣品時(shí)，所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴(yán)格脫水。
三、色譜柱的保存
1、反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng)
使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應(yīng)該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。
2、長期保存色譜柱
如色譜柱要長時(shí)間保存，必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲(chǔ)存于水（含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞）中，并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上，儲(chǔ)存的溫度最好是室溫。
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