一、概述

亞硝酸鹽在肉類制品中作為發(fā)色劑限量使用，讓肉制品看起來(lái)紅紅的好看，但是人類食入0.3～0.5克的亞硝酸鹽即可引起中毒甚至死亡。由亞硝酸鹽引起食物中毒的機(jī)率較高，中毒事件也經(jīng)常發(fā)生。

    肉灌腸中亞硝酸鹽檢測(cè)可以用離子色譜法和分光光度法，本文主要說(shuō)明分光光度法。

二、方案介紹

1、測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)及方法

GB 5009.33-2016，分光光度法

2、所需實(shí)驗(yàn)室儀器及試劑

722S可見(jiàn)分光光度計(jì)、十分之一電子天平、電爐、水浴鍋、常用玻璃儀器等，

飽和硼砂溶液、亞鐵氰化鉀溶液、乙酸鋅溶液、亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液、氨基苯磺酸溶液、鹽酸萘乙二胺溶液等。

3、實(shí)驗(yàn)步驟

試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，在弱酸條件下亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料，外標(biāo)法測(cè)得亞硝酸鹽含量。具體如下：

（1）前期準(zhǔn)備

用燒杯盛水并用電爐加熱至沸騰，備用（制備70度左右的水）；

水浴鍋打開(kāi)電源，讓水沸騰，備用；

取出肉灌腸切開(kāi)，并剁碎，用電子天平稱取5ｇ試樣置于500 mL容量瓶中，加12.5 mL 飽和硼砂溶液，攪拌均勻，加入70℃左右的水約300 mL，于沸水浴中加熱 15 min，取出置冷水浴中冷卻，并放置至室溫。

（2）提取凈化

往樣品瓶中加入5 mL 亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入 5 mL 乙酸鋅溶液，混勻并振蕩提取液，加水至刻度，搖勻，放置30 min，除去上層脂肪，上清液用濾紙過(guò)濾，棄去初濾液30mL，濾液備用。

（3）樣品測(cè)定

吸取40.0 mL 上述濾液于50 mL 帶塞比色管中，另吸取0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng)于0.0μｇ、1.0μｇ、2.0 μｇ、3.0 μｇ、4.0 μｇ、5.0 μｇ、7.5 μｇ、10.0 μｇ、12.5 μｇ亞硝酸鈉），分別置于50 mL 帶塞比色管中。

于標(biāo)準(zhǔn)管與試樣管中分別加入2 mL 對(duì)氨基苯磺酸溶液，混勻，靜置3 min～5 min 后各加入1 mL鹽酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混勻，靜置15 min，用2 cm 比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng) 538 nm 處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較。同時(shí)做試劑空白。

4、計(jì)算公式及結(jié)果

按照標(biāo)準(zhǔn)曲線，輸入吸光度求出濃度A（ug），然后按照下列公式計(jì)算出肉灌腸中的亞硝酸鹽含量mg/kg，通過(guò)計(jì)算查看樣品中的平均含量。

    國(guó)家限量值30mg/kg，如果計(jì)算結(jié)果大于30mg/kg，則該樣品中亞硝酸鹽超標(biāo)。分光光度法加標(biāo)回收率在98.5%以上。

三、小結(jié)

購(gòu)買肉灌腸時(shí)對(duì)顏色鮮艷、特別好看的肉制品，最好謹(jǐn)慎購(gòu)買。

但是臘腸熏肉不一定亞硝酸鹽超標(biāo)，肉類食品加工中，亞硝酸鹽允許在法定范圍內(nèi)、按照許可安全劑量使用，以防止病原微生物生長(zhǎng)、保持肉類色澤，會(huì)有利于肉類的保存和運(yùn)輸。

比如我們常吃的火腿腸、臘腸、熏肉等，只要是正規(guī)產(chǎn)品，食用適量，就不用擔(dān)心安全問(wèn)題。

（內(nèi)容參考儀器信息網(wǎng)）