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各種常見(jiàn)緩沖液的配制方法

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2019-06-13 12:02


    磷酸鹽緩沖液，Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液。然而，這些緩沖液的配制比較麻煩，尤其當(dāng)要獲得特定pH值的緩沖液時(shí)，調(diào)節(jié)pH值是費(fèi)力、費(fèi)時(shí)的事情。對(duì)于Tris等緩沖液等，pH計(jì)是無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量其pH值的。
    那么，有沒(méi)有簡(jiǎn)便的方法來(lái)配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢？
1）配制磷酸鹽緩沖液：由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2）配制檸檬酸（鹽）緩沖液：由Citric Acid（檸檬酸）和Trisodium Citrate（檸檬酸鈉）混合而得。
3）配制醋酸溶液：在水中加入一定體積的醋酸而得。
4）配制Tris緩沖液：由一定量的Tris HCl（Tris酸）和Tris Base（Tris堿）混合而得。
5）重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具：已知一蛋白的分子量（kDa），可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù)，以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反，也可由一個(gè)蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù)，以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。
 

    附：這些緩沖液在溶解重組細(xì)胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例：
1）磷酸鹽緩沖液：1xPBS用于溶解100-19Human KGF 和100-52Human FGF-23等。
2）檸檬酸（鹽）緩沖液：5mM檸檬酸鈉（pH8.0）用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸（pH3.0）用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3）醋酸溶液：10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4）Tris緩沖液：5mM Tris（pH7.6）用于溶解100-18B Human FGF-basic，10mM Tri（pH8.0）用于溶解100-25 Human FGF-8。

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